牙源性角化囊肿标志物成份研究进展

一 湖北医科大学口腔医学院 韩新光综述 赵怡芳 李宏礼审校

摘要 牙源性角化量肿(OKC)是一种良性领骨内病变，由于术前诊断的不确定性和治疗的不和底性，常导致其较高的复发率。近年来，作为OKC标志物成份的研宽受到众多学者的重视。本文回顾了有关OKC标志物的研究进展，它对OKC的鉴别诊断以及发病机理，生物学行为的进一步认识均有重要意义。

关键词 牙源性角化量肿

标志物

牙源性角化囊肿(odontogenic keratocyst,

OKC)是一种比较常见的颌骨内囊性病变，由于其独特的组织学特征和术后易于复发，颇受人们的关注。OKC和其他类型的牙源性囊肿相比，某些成份构成方面有明显的差异，如角蛋白的含量，囊被内可溶性蛋白、免疫球蛋白，糖氨多糖的含量和增殖细胞核抗原等。许多学者把这些特征性的物质作为区别OKC的标志，对OKC进行诊断和鉴别诊断，或探讨它们的发病机理和生物学行为。本文就有关OKC标志物方面的研究进展作如下综述。

1 角蛋白

已有的研究资料表明[]:在牙源性上皮内，能够被一致检测到的主要角蛋白是角蛋白13,

14,19.角蛋白13,14与非角化上皮和复层上皮有关，而角蛋白19是许多单层上皮的主要成份并出现在复层上皮的基底细胞(包括口腔上

皮)。把角蛋白13,14与广泛表达的角蛋白19

相结合分析，可以作为识别牙源性上皮的主要依据。

Homia等 用免疫组织化学染色结合单克隆抗体技术用于研究和比较牙源性囊肿、正常牙龈上皮和造釉细胞瘤的角蛋白含量。结果显示OKC、根尖囊肿和含牙囊肿有独特的角蛋白多肽特征，并且除了一部分含牙囊肿外，它们都缺乏角化麟状上皮大量角蛋白的特性。并发现所有OKC上皮缺乏角化上皮特有的细胞角蛋

白多肽1,9.10,11。这是他们用能与这些角蛋白发生反应的两种单克隆抗体KAS和KK

8.60作出的判断。这些角蛋白是成熟角化细胞的特征。以上角蛋白多肽的缺乏表明，OKC内并没有真正地发生角质化。由此得出结论，真正角质化的出现并不是OKC的特征。他们建议，OKC的标志是出现深染的基底细胞以及细胞

角蛋白8,19。

Matthews运用增强的间接免疫过氧化物酶的方法，利用单克隆特异性抗体对50例牙源维普资bmpelwww.spriceen

国外团学口腔医学分册1997年1月第24卷第1期

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性囊肿进行检测，在所有囊肿标本的上皮衬里测出角蛋白19的存在.这种角蛋白正常由大多数上皮细胞表达。与角化上皮有关的角蛋白

10,11在18例OKC中有17例的基底层以上的细胞内星阳性。他们提出，明显的OKC特征

(角蛋白19,10,11阳性)是取决于细胞的分化，而不是组织来源或囊肿类型。

由于角蛋白的基因表达型已证明与表皮的分化密切相关。Schuler等[用电泳和免疫学的方法.检测3例新鲜的OKC上皮衬里的特殊角蛋白.以便确定是否其独特的组织学表现形式反映在可重复的角蛋白表达型方面。在聚丙烯酰胺凝胶电泳上，从3个标本的细胞支架(cy-taskeleton)提取物中分辨出相同的蛋白表达型。这些蛋白的分子量在角蛋白的分子量范围内40～70kD.并且由7种蛋白组成。这些蛋白的定量和定性分布，在3个标本的提取物中是完全一致的。用抗角蛋白的单克降抗体AE,和

AE,免疫印迹法(immunoblot)分析这些蛋白，证明这些蛋白与角强白有相同的抗原性。这些发现和其他研究一致地把上皮的分化和角蛋白的基因表达联系起来。并且提出共同的基因表达型成为OKC特征性组织学类型的基础。

2增殖细胞核抗原

增殖细胞核抗原(proliferaing cell nuclearantigen,PCNA)与细胞分裂周期有关，是DNA多聚酶一8的一种辅助蛋白，是细胞复制的标志[43]。Browne等[用单克隆抗体PC10对31例牙源性囊肿的上皮衬里PCNA阳性细胞进行测定。结果显示OKC的上皮衬里PCNA阳性细胞最多，并且大部分位于基底层以上(95%),基底层只有5%。OKC的PCNA阳性细胞平均

值(94.4±22.7/mm)和口腔粘膜的平均情

(80.8±20.6/mm)相近似，两者明显高于含牙

囊肿(5.1±3.0/mm)和根尖囊肿(11.0±4.1/

mm)的平均值。PCNA阳性细胞在上皮的分布各组间也不相同。基底层内和基底层以上的PCNA阳性细胞的比率，OKC为0.05±0.02,

明显低于口腔粘膜上皮0.5±1.4,含牙囊肿

1.6±1.23,根尖囊肿1.9±1.09。这些结果同用有丝分裂指数，氟标记胸腺嘧啶渗入和ki6?免疫染色法结果一致。OKC上皮衬里有较大的增生活性，这与其侵袭性的临床行为相一致。

3 P53蛋白

P53蛋白是抗癌基因n53的产物，在正常细胞内，由于其半衰期非常短，以致于用免疫组织化学的方法不能探测出来。Ogden等[用多克隆抗体CM-1对36例领骨囊肿的上皮衬里P53的表大进行了检测。结果12例OKC中5例为阳性，而其它类型的牙源性囊肿，如含牙囊肿、根尖囊肿均为阴性，并用PCNA单克隆抗体PC10进一步染色表明，P53阳性细胞增生活跃。并认为P53阳性可能提示在裹肿衬里有恶性转变的趋势，恶性变在颌骨囊肿中虽然少见，但在OKC中比其他牙源性囊种常见(3.)。

4糖蛋白38

糖蛋白38(glycoprotein38)是基底细胞癌细胞表面强烈表达的一类糖蛋白。High等[1]认为由于OKC和基底细胞癌在基底细胞捷综合征焦者中的关系，OKC的上皮细胞和基底细腋癌细胞可以表达相同的蛋白。他们使用免疫组织化学方法对正常口腔粘膜和毒性病变进行检验时，在不全角化的OKC基底细胞和基底层以上细胞的细胞膜上，发现了分子量为38kD的细胞表面糖蛋白的强烈表达。相反，正角化的OKC和大多数其他类型的牙源性囊肿、造釉细胞瘤、正常的口腔上皮、马拉塞氏上皮剩余均为阴性。这是一个重要的免疫组化标志，可用于不全角化的OKC的诊断，以及造釉细胞癫和基底细胞癌的鉴别诊断。

5糖氮多糖

角化型和非角化型牙源性囊肿的囊液中已证实含有相当数量的糖氨多糖(glycosamino-glycans,GAG)和蛋白多糖(protenglycans),这维卷者迅w

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些物质以其较高的电荷特性增加翼液内的容积渗克分子浓度和囊内流体静压，从而在囊肿膨胀生长方面起着一个重要作用I]。

Smith等[12]研究证实，牙源性囊肿的结缔组织基质含有丰富的GAG和蛋白多糖，并且认为囊肿的结缔组织壁可能是囊液中这类物质的主要来源。利用酶和化学物质消化组织残片，可得到透明质酸(hyaluronic acid),硫酸软骨素(chondroitin-4-sulphate)及其他种少量的硫酸化GAGs.将这些GAG提取物在醋酸纤维膜上进行电泳，出现3个明显的阿辛蓝(Alcianblue)阳性带。这些带的移动性同典型的GAG中标准透明质酸，肝素(heparin)和硫酸软骨素的带型一致。

囊液中含量较高的是透明质酸。通过测量囊液中糖醛酸(uronic acid),可了解GAG和蛋白多糖含量，根尖囊肿平均246.81μg/ml,含

牙囊肿为331.47pg/ml,OKC为92 pg/ml]。

透明质酸和硫酸软骨素一般位于细胞外基质，而肝素出现在细胞内，与肥大细胞颗粒有关.囊液内肝素的出现，反映了肥大细胞的数量和脱颗粒的程度。有趣的是，组织化学检查在一部分囊肿的上皮下，正在脱颗粒的肥大细胞周围发现有细胞外肝素的存在，它们仍可能进入囊液内。

对于OKC,由于其上皮的相对不可通透性，使得高分子物质难以进入囊腔。然而，在OKC可出现非角化的上皮，尤其是位于炎症灶表面的上皮，这些上皮有比较高的通透性，允许GAG进入囊腔。BrowneD提出，囊液中的GAG不是结缔组织降解的结果，而是来源于其他途径.在根尖囊肿和含牙囊肿中，上皮衬里粘被化生(mucous metaplasia)比较常见，而OKC内很少见。阿辛蓝组化结果提示，这些化生细胞与囊液内存在的GAG有关。

6免疫球蛋白

OKC的囊液中含有可溶性蛋白。Browne[s]提出，大多数蛋白质可能来源于炎症

国外医学口腔医学分册1987年1月第24费第1期

渗出物，并通过免疫电泳扩散确定3种主要的免疫球蛋白IgG,TgA和IgM。IgG5倍干IgA,20倍于IgM。囊被内各种免疫球蛋白浓度均高于自身血清，这可能是囊壁自身部分合成的结果。

Smith等[M发现IgG浆细胞在所有囊肿类型中均占优势，并有少量的IgA浆细胞和极少的IgM浆细胞。然而OKC和根尖囊肿及含牙鞭肿相比，有明显减少的IgG浆细胞和明显增多的IgA浆细胞。OKC内IgA浆细胞占所有浆细胞的比例明显高干根尖囊肿和含牙囊肿。一般情况下，IgG浆细胞在慢性弥散性炎症区域占优势。在OKC内，IgA浆细胞比例较高，反映了炎性浸润呈局灶性的性质。免疫学研究结果表明：OKC囊液中免疫球蛋白来源于炎症渗出以及囊壁内局部合成。

7乳铁蛋白

Douglaz等[]测定牙源性囊肿内非血清来源的组成成份，结果显示除OKC外，其他类型的牙源性囊肿也含有乳铁蛋白(lactoferrin),但前者中含量较高。这和以前所报道的乳铁蛋白对OKC具有特异性的结果相反，乳铁蛋白并非OKC的特殊标志。并确定了乳铁蛋白和OKC内白细胞的关系，而含牙囊肿和根尖囊肿却无此种关系。尽管选用的标本来自无炎症症状的患者，以及OKC的感染非常少见，但仍提出，浸润囊壁的多形核白细胞仍是乳铁蛋白的来源，是多形核白细胞的嗜苯胺颗粒的分秘物质。由于OKC囊壁对分子量超过白蛋白(68

kD)的蛋白类物质的相对不可通透性，乳铁蛋白(分子量77～85 kD)通过囊壁的能力也受到妨碍。因此，如果中性白细胞在OKC内脱颗粒，随着时间的增加，乳铁蛋白的浓度也将随之增加[0]。

OKC内，白细胞可能源于白细胞介素-1

(IL-1)的介导。在角化细胞增生的早期产生很

多的IL-1,而晚期相对较少(2)。已知TL-1可以刺激中性白细胞的代谢，导致颗粒成份的释放。

IL-1还可刺激上皮的增生和骨吸收[]。

8抗原X

Douglaz等(1利用免疫组织化学方法对牙源性囊肿，包括OKC、含牙囊肿和根尖囊肿的囊液血清来源成份进行分析时，在OKC的囊液内发现了一种特殊抗原成份，被定为抗原X(antigen X),这种抗原似乎是上皮来源，但与角蛋白无关。并且在十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)时，分辨出两条带型。分子量分别为81 kD和89 kD。它的主要抗原决定簇和二硫键有关。由于其特殊地出现在OKC的囊被内，而且和所有可溶性蛋白的浓度无关，因此，作为一个特殊标志物，为OKC的术前诊断提供了可靠的保证。但是，抗原X作为OKC的诊断标志，尚需一步了解它的性质、来源和分布方面的特点。

此外，有许多有关的上皮细胞标志，如癌胚抗原(CEA),上皮细胞膜抗原(EMA),肿瘤多肽抗原(TPA)以及组织相容性抗原(HLA-1),在所有囊肿衬里上皮中可发现，但反应性变化较大。

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